聯(lián)系電話:
18502669006
人胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒使用說明書 本生一直視質量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業(yè)精神作為標準,以過硬的質量和優(yōu)良的服務來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標,本生,您信任的合作伙伴!本生試劑盒
人胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒使用說明書通常包括試劑盒的用途、實驗原理、試劑盒組成、樣本處理及要求、操作步驟、注意事項以及試劑盒性能等內容。以下是一份基于多個來源整合的IGF-1 ELISA試劑盒使用說明書概要:
一、試劑盒用途
本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中人胰島素樣生長因子1(IGF-1)的含量。
二、實驗原理
試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人胰島素樣生長因子1(IGF-1)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人胰島素樣生長因子1(IGF-1)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
三、試劑盒組成
試劑盒通常包含以下組件(具體數(shù)量可能因不同廠家或批次而異):
酶標包被板
標準品
標準品稀釋液
酶標試劑
樣品稀釋液
顯色劑A液和B液
終止液
濃縮洗滌液
封板膜
密封袋
說明書
四、樣本處理及要求
?血清?:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
?血漿?:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
?組織勻漿?:用預冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5-10分鐘,取上清檢測。
?細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本?:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
五、操作步驟
?標準品的稀釋與加樣?:在酶標包被板上設標準品孔,加入不同濃度的標準品。
?加樣?:分別設空白孔、待測樣品孔,加入待測樣品。
?溫育?:用封板膜封板后置37℃溫育一定時間。
?洗滌?:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置后棄去,重復多次,拍干。
?加酶?:每孔加入酶標試劑(空白孔除外)。
?溫育?:同前。
?洗滌?:同前。
?顯色?:每孔加入顯色劑A和B,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色一定時間。
?終止?:每孔加終止液,終止反應。
?測定?:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。
六、注意事項
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用。
濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。
請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。
封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
底物請避光保存。
嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
所有樣品、洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
七、試劑盒性能
?檢測范圍?:根據(jù)不同廠家和批次,檢測范圍可能有所不同,如5ng/mL~160ng/mL。
?靈敏度?:低檢測濃度小于一定值,如1.0ng/mL。
?特異性?:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
?重復性?:板內變異系數(shù)和板間變異系數(shù)均小于一定值,如板內變異系數(shù)小于10%,板間變異系數(shù)小于15%。
請注意,以上內容僅為一般性說明,具體使用時應嚴格遵循所購試劑盒附帶的使用說明書進行操作。